РАЗДЕЛ 2
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Необходимость расширения ассортимента отечественного фармацевтического рынка
мазей для лечения ран со ІІ-й и ІІІ-й фазой раневого процесса новыми
лекарственными средствами, соответствующих современным требованиям
эффективности и безопасности, а также известный спектр фармакологической
активности БАВ сои послужили основанием для создания новой растительной
субстанции – липофильного экстракта сои (ЛЭС) и включения его в состав новой
ранозаживляющей мази «Гексафен».
Первый объект исследования – ЛЭС был получен методом прямого прессования и
соответствует требованиям ТУ У 19368062.002-2000. В ЛЭС содержится 89%
нейтральных липидов, 10% фосфолипидов и 2% гликолипидов. Нейтральные липиды
ЛЭС, прежде всего, представлены триглицеридами или триацилглицеринами с разными
жирно-кислотными остатками, свободными жирными кислотами, стеринами и
стериновыми эфирами. В таблице 2.1. представлен жирно-кислотный состав ЛЭС.
Как видно из таблицы, наиболее распространенные ненасыщенные кислоты –
олеиновая, линолевая и линоленовая. Кроме того, в состав липидов ЛЭС входят
такие важные биологически активные вещества, как фосфолипиды (1,5,2,5%),
каротиноиды (1,0-3,1мг%), токоферолы (0,15-0,21 %), стерины (0,19-0,30%).
Основным компонентом фосфолипидов является фосфатидилхолин, токоферолов – б
токоферол, стеринов – в-ситостерин.
Таблица 2.1
Жирно-кислотный состав ЛЭС
Наименование кислоты
Индекс кислоты
Содержание, %
Насыщенные:
лауриновая
С12:0
<0,1
миристиновая
С14:0
<0,1
пальмитиновая
С16:0
9,19
стеариновая
С18:0
4,97
арахидоновая
С20:0
0,55
Всего
16,71
Ненасыщенные:
палмитоолеиновая
С16:1
олеиновая
С18:1
25,01
линолевая
С18:2
50,05
линоленовая
С18:3
7,53
эйкозеновая
С20:1
0,25
Всего
82,84
Вторым объектом исследования была выбрана фармацевтическая композиция в форме
мази «Гексафен», разработанная на кафедре промышленной фармации НФаУ под
руководством профессора В.И.Чуешова и предназначенная для лечения ІІ-й и ІІІ-й
фаз раневого процесса, с учетом чего и были выбраны основа и состав данного
препарата [71, 72].
При создании мазей для лечения ран на ІІ-й и ІІІ-й фазе раневого процесса
основа должна обеспечивать высокую степень высвобождения лекарственных
субстанций и создавать в ране умеренный уровень дегидратации. Этим требованиям
отвечает эмульгелевая основа, которая и была использована для создания мази
«Гексафен».
Состав мази «Гексафен» приведен в таблице 2.2.
Таблица 2.2
Состав мази «Гексафен»
Тип мазевой
основы
Содержание компонентов, г
Эмульгелевая
Гексаметилентетрамин 10,0
Фенилсалицилат 10,0
Тиотриазолин 1,0
Липофильный экстракт сои 10,0
Спирт цетостеариловый эмульгирующий (тип А) 8,0
Токоферола ацетат (витамин Е) 1,0
Карбомер 980 1,0
Триэтаноламин до рН 5,0-7,0
Вода очищенная до 100,0
В состав мази входят антимикробные средства гексаметилентетрамин и
фенилсалицилат, тиотриазолин с антиоксидантными и репаративными свойствами и
ЛЭС как стимулятор репаративных процессов в ране.
Эмульгелевая основа содержит в качестве гелеобразователя сополимеры акриловой и
метакриловой кислот – карбомер 980. В состав основы входит комплексный
эмульгатор спирт цетостеариловый эмульгирующий (тип А), в качестве регулятора
рН (5,0-7,0) использован триэтаноламин и дополнительно – токоферола ацетат
(витамин Е) в качестве стабилизатора-антиоксиданта.
Экспериментальные исследования фармакологических свойств и оценку возможного
токсического действия объектов исследования выполнены с использованием четырех
видов животных: нелинейных половозрелых белых крыс обоего пола массой 180-230
г, нелинейных половозрелых белых мышей обоего пола массой 18-20 г, морских
свинок массой 350-550 г и беспородных кроликов массой 2,5-3 кг. Работа с
животными проводилась в соответствии с Международными требованиями о гуманном
отношении к животным и с выполнением требований директивы 86/609/ЕЕС по
вопросам защиты животных.
На первом этапе наших исследований проведено изучение фармакологических свойств
ЛЭС.
Известно, что начальным этапом раневого процесса является альтеративное и
экссудативное воспаление, поэтому было целесообразным изучить влияния ЛЭС на
течение воспалительного процесса на различных моделях.
Для оценки выраженности противовоспалительных и репартивных свойств ЛЭС в
качестве препаратов сравнения были выбраны масло облепихи (AT "Киевский
витаминный завод") в дозе 2 мл/кг как аналог по составу и по механизму
действия, и на моделях экссудативного воспаления – нестероидный
противовоспалительный препарат с хорошо изученным механизмом действия
диклофенак натрия под торговым названием «Вольтарен» в дозе
8 мг/кг.
Согласно Методическим рекомендациям по доклиническому изучению
противовоспалительных средств [107, 108], противовоспалительную активность
липофильного экстракта сои изучали на моделях экссудативного воспаления,
вызванного каррагенином (1% раствор), зимозаном (2% раствор) и формалином (2%
раствор). Флогогены субплантарно вводили в заднюю лапу крысы/мыши в объеме
0,1/0,01 мл за 1 час до внутрижелудочного ведения исследуемых объектов: ЛЭС в
эмпирических дозах 2, 4, 8 мл/кг, вольтарен в дозе 8 мг/кг (ЭД50 по Сигидину
Я.А. и соавт. и 2,3 мг/кг (дл
- Київ+380960830922