ГЛАВА 2
МАТЕРИАЛЫ И ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
Выбор объектов и методов исследований настоящей диссертационной работы был
обусловлен ее главной задачей - исследованием L-аргинина L-глутамата и его
лекарственных форм в качестве гипоаммониемических и гепатопротекторных
средств.
Объектами исследований служили субстанция L-аргинина L-глутамата и ее
лекарственные формы - таблетки и инъекционный раствор Глутаргина.
L-аргинина L-глутамат представляет собой белый кристаллический порошок без
запаха, хорошо растворимый в воде.
* L-АРГИНИНА L-ГЛУТАМАТ (C11H23N5О6) - соль двух аминокислот: L-аргинина и
кислоты глутаминовой (2-аминоглутаровой кислоты). Молекулярная масса 321,33.
H2N+= C-NH-CH2-CH2-CH2-CH-COOH
NH2 NH2
- OOC-CH2-CH2-CH-COOH
NH2
Рис.2.1 L-Аргинина L-Глутамат (L-А-L-Г)
Лекарственные формы, явившиеся предметом исследований по теме диссертации,
разработаны в ГНЦЛС и имеют следующий состав:
l РАСТВОР L-АРГИНИНА L-ГЛУТАМАТА 4% ДЛЯ ИНЪЕКЦИЙ разработан в отделе
инъекционных лекарственных средств ГНЦЛС (зав. отд. - Сухинин В.Г.),
представляет собой бесцветную прозрачную жидкость для внутривенного введения,
содержащую 0,2 г L-А- L-Г в 5 мл.
l ТАБЛЕТКИ L-АРГИНИНА L-ГЛУТАМАТА по 0,25 г разработаны в отделе
таблетированных лекарственных средств ГНЦЛС (зав. отд. - Казаринов Н.А.),
представляют собой таблетки белого цвета, содержащие L-аргинина L-глутамат -
0,25 г и вспомогательных веществ (крахмала картофельного, кальция стеарата) до
получения таблеточной массы - 0,4 г.
Перечисленные препараты получили соответственно названия: "Раствор Глутаргина
4% для инъекций", "Таблетки Глутаргина 0,25 г" (ФС № 42У-7/37-904-00 и ФС №
42У-7/37-905-00).
В качестве препаратов сравнения использовали:
* глутаминовую кислоту;
* аргинина гидрохлорид;
* смесь глутаминовой кислоты и аргинина гидрохлорида;
* Гепа-Мерц, инъекционный раствор и гранулят (Merz & Co. GmbH, Германия),
действующим веществом которого является орнитина аспартат. Орнитин и
аспарагиновая кислота по ряду фармакологических свойств сходны с аргинином и
глутаминовой кислотой, а Гепа-Мерц применяется в качестве гипоаммониемического
и гепатопротекторного средства.
* Силибор, таблетки (ОАО "Фармацевтическая фирма "Здоровье", Украина),
действующим веществом которого является силибинин;
* Метионин, таблетки ("Октябрь", Россия);
* Фламин, таблетки (ОАО "Фармфирма "Здоровье", Украина), действующим веществом
которого является сухой концентрат бессмертника, содержащий сумму флавонов;
* Неогемодез, раствор для инфузий (ООО "Юрия-Фарм", Украина).
Последние пять препаратов хорошо известны в качестве лекарственных средств,
применяемых при различных острых и хронических поражениях печени.
Для решения поставленных задач в работе использованы методы, позволяющие
всесторонне оценить спектр фармакологических свойств L-аргинина L-глутамата и
его лекарственных форм как гипоаммониемических и гепатопротекторных средств по
их влиянию на обмен аммиака и функциональное состояние печени.
Выбор исследований экспериментального раздела диссертации основывался на
результатах анализа современных сведений о патогенезе гипераммониемии и роли
заболеваний печени, как одного из основных этиологических факторов в развитии
гипераммониемии, а также существующих направлениях фармакотерапии
гипераммониемии и литературных данных о фармакологических свойствах и
клиническом применении глутаминовой кислоты и аргинина.
На первом этапе работы экспериментальные исследования были направлены на
выяснения целесообразности разработки L-аргинина L-глутамата как
гипоаммониемического и гепатопротекторного средства.
На втором этапе - исследовали спектр и механизмы фармакологических свойств
L-аргинина L-глутамата в составе его лекарственных форм: таблеток и
инъекционного раствора Глутаргина.
Исходя из этого, фармакологические свойства L-аргинина L-глутамата изучали на
различных по этиопатогенезу моделях экспериментальной патологии:
* острой экзогенной ГА аммония ацетатом (ЛД90), крысы;
* острой экзогенной ГА аммония ацетатом (ЛД50), крысы;
* острой экзогенной ГА аммония ацетатом (ЛД50) на фоне ингибирования синтеза
оксида азота, мыши;
* подострой экзогенной ГА аммония хлоридом, крысы;
* остром отравлении CCl4, крысы, мыши;
* остром отравлении солянокислым гидразином, крысы;
* подостром отравлении парацетамолом, крысы;
* хроническом отравлении CCl4, крысы.
Указанные экспериментальные модели являются общепринятыми в фармакологии и по
некоторым механизмам патогномоничными ГА у человека, в том числе ГА,
обусловленной печеночной недостаточностью [133-138]. Это позволяло с
достаточной степенью надежности изучить спектр и выраженность как
гипоаммониемических, так и гепатопротекторных свойств L-аргинина L-глутамата, а
также оценить взаимосвязь соответствующих эффектов.
Искомые фармакологические свойства L-аргинина L-глутамата и его лекарственных
форм исследовали в двух основных методологических направлениях, позволяющих
выявить и количественно оценить гипоаммониемические и гепатопротекторные
эффекты изучаемых препаратов.
Гипоаммониемическую активность и механизмы ее реализации оценивали по влиянию
L-аргинина L-глутамата и его лекарственных форм на выживаемость животных,
содержание аммиака в крови и мозге и другие показатели азотистого обмена в
организме (низкомолекулярные азотсодержащие компоненты крови).
Скрининговые исследования гипоаммониемического действия L-аргинина L-глута
- Київ+380960830922