ГЛАВА 2
МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Для достижения поставленной цели и решения задач была разработана программа
исследований, предусматривающая 4 этапа.
На первом этапе (рис.2.1) проведен клинико-статистический анализ течения
беременности, родов и послеродового периода у 144 юных пациенток в возрасте от
14 до 18 лет. У 124 из них были выявлены железодефицитные состояния (у 47
преданемия, у 77 ЖДА I степени). У 20 юных беременных были нормальные
показатели красной крови, и они составили контрольную группу (рис.2.1). Анализ
клинического течения беременности и родов у всех обследованных осуществлялся с
помощью личной анкеты с учетом вероятных факторов риска развития анемии,
начиная с антенатального периода. Выявлены факторы риска возникновения
железодефицитной анемии, составлена шкала степени их значимости в баллах, и на
основании этих данных разработана карта обследования.
На втором этапе (рис.2.1) проведено комплексное обследование и лечение
железодефицитных состояний у 100 беременных в возрасте от 14 до 18 лет. І
группу составили 30 юных беременных с I ст. ЖДА, получавших терапию по методике
с использованием препарата глобирон, ІІ-ю – 30 пациенток с I ст. ЖДА,
лечившихся по разработанной нами схеме с применением препарата «Залізне вино»,
ІІІ-ю – 20 пациенток с преданемией, также пролеченных по предложенной нами
схеме с использованием ЗВ. Контрольную группу второго этапа работы составили 20
юных беременных того же возраста без признаков нарушения эритропоэза. Изучены
динамика показателей эритропоэза, уровни секреции фетоплацентарных гормонов и
кортизола, некоторых показателей иммунологического статуса до и после лечения
преданемии и I степени ЖДА.
На третьем этапе на основе полученных данных разработаны способы профилактики и
лечения преданемии и I степени ЖДА у юных беременных методом раннего активного
применения терапии растворимыми железосодержащими препаратами глобирон и
«Залізне вино», как одними из материально малообременительных для юных
пациенток, 78,8% которых были из малообеспеченных семей.
Глобирон сироп (Дженом Биотек, Индия) – железа (III) гидроксид полимальтозный
комплекс, в каждых 5 мл которого содержится 50 мг гидроксида железа.
Раствор сахарата окисного железа (торговое название «Залізне вино»),
производимый Львовской фармацевтической фабрикой, утвержден Фармкомитетом МОЗ
Украины 10.03.98 г. (регистрационный номер Т/98/61/6). В 10 мл препарата
содержится 40 мг сахарата окисного железа. Использование этого препарата в
предложенной нами схеме профилактики и лечения железодефицитных состояний у
юных беременных обусловлен тем, что этот отечественный железосодержащий
препарат в виде питьевого раствора достаточно эффективен для пополнения депо
железа и лечения железодефицита по сравнению с таблетированными препаратами, о
чем свидетельствует отчет об ограниченных клинических испытаниях «Залізного
вина» (№2445/в от 13.11.98 г.), проведенных, согласно решения Фармкомитета МОЗ
Украины, на базе кафедры гастроэнтерологии и диетотерапии Киевской медицинской
академии последипломного образования им.П.Л.Шупика.
На четвертом этапе работы изучена эффективность предложенного способа
профилактики и лечения преданемии и I степени ЖДА у юных беременных, а также
улучшения показателей иммуно-гормонального гомеостаза, клинического течения
беременности и родов у них.
Обследование юных беременных проведено с применением комплекса методов:
2.1. Изучение акушерско-гинекологического анамнеза, социально-бытовых условий
развития юных пациенток, микросоциологических аспектов сферы их жизни.
2.2. Общепринятые клинико-инструментальные обследования беременных,
ультразвуковая диагностика. Изучены особенности клинического течения
беременности и родов у юных беременных с преданемией и I степенью ЖДА до и
после лечения.
2.3 Биохимические исследования. Состояние эритропоэза оценивалось количеством
эритроцитов, относительным количеством ретикулоцитов, уровнем гемоглобина,
цветным показателем, гематокритом, степенью пойкило- и анизоцитоза. Содержание
сывороточного железа определялось с помощью наборов фирмы «Bio La Test»
(Чехия). Ферритин сыворотки крови определялся иммуноферментным методом на
ИФА-анализаторе фирмы «Hoffman-la-Roshe» (Франция).
2.4. Изучение уровня фетоплацентарных гормонов (прогестерона, эстриола,
плацентарного лактогена) и кортизола в крови проводили радиоиммунологическим
методом (наборы фирмы «ESA-IRE-Soring» (Франция)). При этом руководствовались
данными региональных нормативных параметров, разработанных в лаборатории
гормонодиагностики ЦНИЛа (С.В.Зяблицев и соавт., 1998). Кровь для исследования
забирали натощак в 8 часов утра из локтевой вены в положении лежа в объеме 5 мл
с антикоагулянтом (25 ЕД гепарина на 1 мл) стерильно.
2.5. Показатели клеточного иммунитета изучали методом прямой
иммунофлюоресценции. Использовали моноклональные антитела фирмы «Ortho
Diagnostic System». Субпопуляции лимфоцитов подсчитывали исходя из экспрессии
дифференцировочных антигенов на поверхности клеток. Общие Т-лимфоциты
идентифицировали по экспрессии антигена СД3 (норма 69–85%), Т-хелперы/индукторы
– СД4 (норма 23–47%), Т-супрессоры/цитотоксические лимфоциты (ЦТЛ) – СД8 (норма
16–32%), В-лимфоциты – СД22 (норма 10–17%). Иммунорегуляторный индекс (И)
рассчитывали по формуле:
И = ,
где СД4 – Т-хелперы/индукторы,
СД8 – Т-супрессоры/ЦТЛ.
Состояние гуморального звена иммунитета оценивали на основании содержания
иммуноглобулинов (Ig) классов Ig А (норма 1,00–2,60 г/л), Ig М (норма 0,80–1,40
г/л) и