РАЗДЕЛ 2
ОБЪЕКТЫ, МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1 Обоснование выбранного направления
Объективно существующая нехватка донорских почек, применение которых для пересадки возможно, привела к расширению критериев пригодности трансплантата. Одним из путей решения этой проблемы является использование в трансплантологии трупных "педиатрических" почек, для которых, с другой стороны, очень остро стоит проблема повреждения как дистрофического, из-за развития сегментарного склероза, так и ятрогенного, вследствие хирургических осложнений [30, 130, 145?. Существует объективная необходимость в сохранении нейротрофического воздействия на подобные трансплантанты после пересадки, поскольку процессы их органогенеза будут завершаться уже в организме реципиента.
Учитывая результаты анализа современной мировой медицинской литературы по вопросу нейросохраняющих технологий и реиннервации в нефротрансплантологии, не остается сомнений в необходимости исследования этой недостаточно изученной до настоящего времени проблемы. Количество ежегодных публикаций по этому вопросу пока весьма ограничено, составляя 2-3 упоминания. Но результаты литературного поиска обнаруживают следующие основные положения:
-при классической методике забора трансплантата почка превращается в тотально денервированный орган;
-спонтанная реиннервация органа либо органокомплекса при использовании классической "парижской" методики пересадки не эффективна, поскольку реципиентная зона в данном случае значительно удалена от естественного месторасположения и в ней нет анатомических "стимулов" для направленного врастания местных нейроструктур в орган либо органокомплекс;
-применяемые в настоящее время схемы фармокологической нейро-вегетативной защиты вне активной хирургической коррекции не могут полностью компенсировать указанные нарушения;
-в литературе нет фундоментальных описаний нейросохраняющих методик забора органов и ДПОК, а известные хирургические приёмы сложны в техническом исполнении, а также не предусмотрены для реиннервации ДПОК.
Первичный материал для исследования был в основном массиве собран до издания рекомендаций Министерства охраны здоровья Украины об ограничении использования в качестве лабораторных животных спутников человека, а именно собак. Последние были выбраны в качестве объекта для наших экспериментальных исследований, в той связи, что внутрипочечный нейроклеточный аппарат многодольной почки человека и крупных экспериментальных животных, являющихся высшими млекопитающими, является принципиально сходным: он малочисленен и локализован в основном в микроганглиях почечной пазухи. Паренхима почки указанных объектов во взрослом состоянии содержит очень мало нервных клеток. Внутрипочечные сосуды и её паренхима получают преимущественно эфферентную симпатическую иннервацию, подавляющая часть интраорганных нейротерминалей которой выделяет в синаптические щели медиатор норадреналин. Основным и самым мощным внутриорганным сплетением почки считается кортико-медуллярное - на границе коркового и мозгового слоев, а наиболее "иннервированными" структурами - сосудистые полюса почечных телец и проксимальные канальцы. Выбор собак объясняется также сходством с человеческим строения их нейро-ганглиозных сплетений, функциональной аналогией нервного аппарата почек, а также макронейроморфологией донорской и реципиентной зон при пересадке почки. Идентичные признаки структурно-функционального построения нервного аппарата почки у человека и крупных лабораторных животных, используемых в экспериментальной трансплантологии в сходстве локализации нервных клеток в клетчатке почечной пазухи, распределению нервных волокон по ходу внутрипочечного сосудистого русла и среди паренхиматозных элементов [43, 85, 110, 157]. В процессе сравнения строения почечного сплетения человека и собаки установлена также принципиальная идентичность источников иннервации (внутренностные нервы, солнечное сплетение и симпатический ствол), а также макро-микроскопическое аналогии структуры и топографии самого почечного вегетативного сплетения: так, выделяются сходно расположенные верхний и нижний аортально-почечные узлы, также взаиморасположение стволиков сплетения по отношению к почечной ножке и другие признаки [75, 88, 105].
Для подтверждения технической воспроизводимости предложеных методик реиннервации трансплантатов использовали трупный материал, отрабатывая все основные этапы забора с сохранением собственных вегетативных сплетений ДПОК, а также нативные трупы взрослых для отработки техники нейросохраняющего забора монотрансплантатов. Полученные органокомплексы размещали в донорской зоне нефиксированных трупов, после чего отрабатывали технику формирования сосудистых анастомозов и нейровосстановительные приемы.
В Украине принят Закон о трансплантации органов и других анатомических материалов человека, утверждающий "систему согласия", то есть явно выраженное согласие на изъятие органов от умерших, в соответствии с которым до своей кончины умерший активным образом заявлял, что он не возражает против изъятия органа, либо члены семьи выражают согласие в том случае, когда умерший не оставил никакого заявления или иного свидетельства противоположного мнения. К сожалению, политика в информационной сфере Украины, в отличие от таковой большинства развитых стран мира, здерживает развитие трансплантологии. В связи с вышеперечисленными фактами и единичными случаями пересадки органов в нашей стране в настоящее время осуществить клинические апробации и внедрение предложенных нами методик не представляется возможным.
2.2 Характеристика объектов и материалов исследования
Экспериментальные исследования проведены на базе кафедры оперативной хирургии с топографической анатомией Донецкого государственного медицинского университета, а также экспериментального блока Института неотложной и восстановительной хирургии АМН Украины. Условия проведения экспериментов: температура воздуха в