РАЗДЕЛ 2
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.1. Особенности методологии исследования и методы обследования беременных
Для решения поставленных цели и задач начальным этапом исследования было
изучение отдельных патогенетических механизмов развития ПН у беременных с ИН
крови матери и плода.
На втором этапе, с учетом определенных патогенетических механизмов развития ПН
у беременных с ИН крови матери и плода, был разработан комплекс
лечебно-профилактических мероприятий.
На третьем этапе исследования проведено изучение клинической эффективности
разработанного комплекса лечебно-профилактических мероприятий у беременных с ИН
крови матери и плода, проведен сравнительный анализ с традиционным комплексом
лечебно-профилактических мероприятий.
Основная задача акушера-гинеколога – это снижение перинатальной заболеваемости
и смертности. Эта задача приобретает особую важность при ведении беременных с
ИН крови матери и плода. Поэтому, наметив пути снижения частоты и тяжести
акушерских и перинатальных осложнений, необходимо решить ряд поставленных
задач. Учитывая, что изоиммунизация сопровождается дисфункцией плацентарного
комплекса, необходимо провести оценку состояния последнего, выявить
доклинические маркеры его дисфункции, что позволит прогнозировать риск развития
изоиммунизации и формировать соответствующие группы риска. Данное положение
может быть реализовано и в 1-м триместре беременности, что повысит качество
профилактики, лечения и эффективность следующего этапа прогнозирования.
Комплексная оценка состояния эндокринной системы женщины, начиная с
1-го триместра гестации, позволила установить оптимальное количество
прогностических маркеров для данного вида патологии, на основании которых
возможно ее прогнозирование уже в ранние сроки беременности и переход от
массового скрининга к селективному. Поэтапный алгоритм характеризовался
суммированием рисков, что повысило качество диспансерного наблюдения беременных
с ИН крови матери и плода, а данный контингент женщин формирует группу риска по
развитию изоиммунизации и перинатальной патологии.
Исходя из результатов прогнозирования, пациентке можно рекомендовать комплекс
диагностических и лечебно-профилактических мероприятий с использованием
медикаментозных и немедикаментозных средств.
Оценка эффективности антенатальной профилактики ГБН была запланирована в
группе, состоявшей из резус-отрицательных беременных женщин без признаков
изоиммунизации, у которых были резус-положительные мужья. Логично предположить,
что ПН различной степени выраженности сопровождалась возникновением
фетоматеринской трансфузии, различной по объему, и подтверждала необходимость
индивидуализации при расчете доз вводимого антирезус-иммуноглобулина.
Изоиммунизация способствует развитию ПН, которая приводит к прогрессированию
последней. Развивается, своего рода, порочный круг.
Генез ПН при изоиммунизации имеет эндотелийзависимое происхождение. Исходная и
развивающая «механика» этой патологии связана с нарушением дисбаланса
эндотелиальных субстанций – нерегламентируемым усилением роли одних и
ослаблением «оппозиционной» работы других. Здесь видится важный и совершенно
новый подход: понимание болезни как развивающегося дисбаланса химических
регуляторов, то есть нарушения системы противостояния.
Исследование пусковых механизмов повреждения микроциркуляции привело к изучению
влияния таких вазоактивных веществ, как ЭТ-1, NO, ФВ.
Поскольку показатель эстриола в крови беременных отображает функцию
плацентарного комплекса в полной мере, была изучена динамика содержания
плацентарного лактогена у женщин обследованных групп.
Морфологические особенности формирования фетоплацентарного комплекса при ИН
позволит уточнить патогенетические механизмы формирования ПН.
Кроме общепринятых клинико-лабораторных методов, согласно приказу МОЗ Украины №
503, в проводившихся исследованиях изучали объем фетоматеринской трансфузии,
показатели изоиммунизации.
Величину фетоматеринской трансфузии и скорость иммунологической элиминации
фетальных эритроцитов из кровяного русла матери определяли по количеству
эритроцитов плода в мазке материнской крови.
Диагностика резус-изоиммунизации основывалась на исследованиях титра неполных
антирезус-АТ в сыворотке крови. В случаях, когда у резус-отрицательных женщин
имелся отягощенный акушерский анамнез, но не выявлялись неполные антирезус-АТ,
прибегали к определению полных АТ.
Для исключения резус-конфликта проводили прямую пробу Кумбса.
Для повышения достоверности результатов проводили определение АГ эритроцитов и
антиэритроцитарных АТ в геле.
Содержание гормонов (эстриола, ПЛ) в сыворотке крови у женщин изучалось методом
иммуноферментного анализа с помощью диагностических наборов фирмы «Био РАД»
(США) (Йена С.С.К., Джаффе Р.Б., 1988). Количество эстриола определяли в нг/мл,
ПЛ – мг/л.
Определение фетального гемоглобина в мазках крови
Фетальный гемоглобин (HbF) в мазках крови определялся по цитологическому методу
E. Kleihauer (по R.H. Walker) [211].
Принцип метода состоит в том, что в кислой среде происходит вымывание
гемоглобина взрослого (HbA) из эритроцитов матери, фиксированных в мазке крови,
в то время как фетальный гемоглобин (HbF), содержащийся в эритроцитах плода,
устойчив к действию кислоты и может быть продемонстрирован последующим
окрашиванием [211, 217].
Для определения HbF тонкий свежеприготовленный мазок капиллярной крови матери
фиксировали в 80 %-ном растворе этилового спирта в течение 5 минут, промывали
дистиллированной водой и высушивали. Для элюции HbА мазок погружали на 5 минут
в предварительно подогретый до температуры 37 ОС цитратно-фосфатный б
- Київ+380960830922