раздел 2.2.1) подключали трубопроводы
датчиков давления, заполненные изотоническим раствором натрия хлорида.
Запись венозного давления в ПС и давления во внутренней сонной артерии
проводили с помощью хирургического полиграфа «Салют». Венозное давление (ВД) и
артериальное давление (АД) измеряли в мм рт. ст. и переводили в кПа.
Параллельно проводили регистрацию частоты сердечных сокращений.
Собак выводили из эксперимента на первые, пятые и десятые сутки после операции
(таблица 2.1).
Эвтаназию производили путем внутриплеврального введения 10 % раствора
тиопентала натрия из расчета 60–75 мг/кг (согласно Приложения №4 к Правилам
проведения работ с использованием лабораторных животных №755 от 12.08.1977
г.).
Рис. 2.3. Схема устройства для временного закрытия просвета верхней сонной
артерии (рационализаторское предложение № 007/Р, 2002 г.):
1 – внутреннее упорное кольцо; 2 – трубочка; 3 – наружное упорное кольцо;
4 – лигатура; 5 – кровеносный сосуд. А – просвет сосуда сохранен;
Б – просвет сосуда сужен.
Рис. 2.4. Защитный ошейник (1) для предотвращения извлечения катетеров (2)
собакой (схема).
2.2.3. Инъекция сосудистого русла гипофиза. Изучение сосудистого русла передней
доли гипофиза проводилось путем инъекции его взвесью черной туши в 5 % растворе
желатины.
Для инъекции сосудов головного мозга и гипофиза использовали катетеризированные
vv. аngulares и vv. ophthalmice sup. [25].
Для обеспечения стандартных условий в опытах было использовано устройство,
которое позволяет производить инъекцию сосудистого русла под постоянным
давлением, регулируемым визуально (рационализаторское предложение № 006/Р, 2002
г.) (рис. 2.5).
Перед инъекцией производили герметизацию шейных и спинномозговых сосудов путем
передавливания их специальным винтовым прессом [22]. Затем выполняли трепанацию
свода черепа с размером трепанационного отверстия 3ґ4 см. Каналы диплоических
вен пломбировали пластилином путем вдавливания его в торец кости. В твердой
мозговой оболочке с двух сторон от верхнего сагиттального синуса выкраивали
полукруглый лоскут с основанием к синусу.
Инъекцию сосудов головного мозга и гипофиза выполняли 5 % раствором
тушь-желатины, нагретым до 40–45° С, через катетеры, введенные в vv. аngulares
и vv. ophthalmice sup. Инъекционную массу вводили в сосудистое русло под
постоянным давлением 60 мм вод. ст. до полного заполнения поверхностных вен
головного мозга. Качество инъекции контролировали также по заполнению вен
языка, век и глазного яблока. После инъекции катетеры герметизировали, головной
мозг охлаждали в проточной воде, препарат погружали в фиксатор: 10 % формалин,
приготовленный на фосфатном буфере [20].
У части животных (таблица 2.1) не выполняли инъекцию сосудистого русла
головного мозга и гипофиза. У этих животных изучали гистологические и
ультраструктурные особенности тканевых элементов передней доли гипофиза.
Рис. 2.5. Схема устройства для инъекции сосудов головного мозга и гипофиза
(рационализаторское предложение № 006/Р, 2002 г.). Емкость 1 трубопроводом 2
соединена с насосом роторного типа 3, который трубопроводом 4 соединен с
камерой 5, на входе которой стоит клапан 6, предотвращающий обратный ток
инъекционной массы. Отверстия камеры 5 соединены с электроманометром 7,
регулирующим скорость вращения электромотора 8, а через трубопровод 9 камера 5
соединяется с инъекционной иглой 10, введенной в кровеносный сосуд 11.
2.2.4. Определение сорбционной способности тканевых элементов передней доли
гипофиза. Динамику сорбции красителя тканевыми элементами передней доли
гипофиза определяли путем сравнения количественных показателей сорбционной
способности тканей передней доли гипофиза контрольных и опытных животных
(Виноградов А.А, по авт. св. № 1465767 от 15 ноября 1988 г.) [28].
Исследование проводили под общим обезболиванием (3 мг/кг 5 % раствора натрия
тиопентала внутриплеврально). Внутрисердечно вводили
0,5 % водный раствор нейтрального красного (класс по Соlour Index 2-е издание,
ВR № 50040) из расчета 0,5 мл на 100 г массы животного.
Через 15 мин после введения красителя выполняли эвтаназию. Извлекали гипофиз
(на льду), разрезали его в сагиттальной плоскости на две половины. Каждую
половинку передней доли гипофиза делили на девять частей двумя разрезами в
горизонтальной плоскости (верхняя, центральная и нижняя трети) и двумя
разрезами во фронтальной плоскости (передняя, средняя и задняя трети)
(рационализаторское предложение № 009/Р, 2002 г.,
рис. 2.6).
Кусочки передней доли гипофиза высушивали на фильтровальной бумаге и помещали в
пронумерованные пробирки, содержащие по 3,0 мл 70 % этилового спирта, в
который, для того чтобы подкислить раствор, добавляли несколько капель 0,1 %
раствора соляной кислоты. Через 24 ч кусочки передней доли гипофиза извлекали
из спирта, помещали в термостат, где высушивали до постоянной массы при
температуре +55° С и взвешивали. Для получения стабильных показателей
концентрации красителя спиртовые вытяжки очищали путем осаждения сопутствующих
примесей. Для этого в каждую пробирку со спиртовой вытяжкой добавляли по 1 мл
100 % ацетона. В верхний слой спиртово-ацетоновой смеси вводили неуплотненный
кусочек ваты и пробирки центрифугировали в течение 5 мин при скорости 1000
об/мин. Затем раствор колориметрировали на концентрационном колориметре
КФК-2МП-УХЛ 4.2. В память ЭВМ колориметра предварительно закладывали информацию
о концентрации. Показатель сорбции рассчитывали в мкг/г путем деления
показателя концентрации нейтрального красного на массу сухого остатка.
2.2.5. Фиксация ма