2
ОГЛАВЛЕНИЕ
Стр.
ВВЕДЕНИЕ............................................................ 6
Актуальность темы............................................. 6
Научная новизна............................................... 7
Практическая ценность работы.................................. 8
ГЛАВА 1. Обзор литературы.......................................... 9
1.1. Общая характеристика красавки............................. 9
1.2. Особенности алкалоидного состава красавки................ 12
1.3. Выделение алкалоидов...................................... 23
1.3.1.Очистка извлечений в лабораторных условиях............... 25
1.3.2. Очистка с помощью жидкофазной экстракции................ 26
1.3.3. Хроматографическая очистка.............................. 26
1.4.Промышленное получение алкалоидов из травы красавки... 28
1.5. Методы идентификации тропановых алкалоидов................ 31
1.5.1. Качественные реакции................................... 31
1.5.2. Хроматографические методы идентификации................ 36
1.5.3. Масс-спекторометрия и другие спктороскопические мето- 38
ды
1.6. Количественное определение тропановых алкалоидов 45
1.6.1. Гравиметрия............................................ 46
1.6.2. Титриметрия............................................ 46
1.6.3. Экстракционная фотометрия.............................. 47
1.6.4. Бумажная хроматография................................. 58
1.6.5. Тонкослойная хроматография............................. 59
1.6.6. Газовая хроматография.................................. 60
1.6.7.Высокоэффективная жидкостная хроматография (количественное определение и идентификация)................... 65
1.7. Фармакологические свойства алкалоидов красавки 67
3
1.7.1. Биологическая активность................................. 67
1.7.2. Применение в медицине.................................... 68
1.7.3. Противопоказания к применению тропановых алкалоидов и их побочное действие................................. 69
1.7.4. Взаимодействие с другими лекарственными средствами. 69
1.7.5. Лекарственные средства, содержащие алкалоиды красавки ..................................................... 70
ГЛАВА 2. Обсуждение результатов...................................... 78
2.1. Выделение алкалоидов....................................... 78
2.2. Разработка метода количественного определения суммы алкалоидов в экстрактах красавки........................... 94
2.2.1. Изучение стабильности растворов тропеолина ООО-П и
его ионных ассоциатов с алкалоидами............................ 103
2.2.2. Влияние pH среды на полноту извлечения ионных ассоциатов алкалоидов......................................... 107
2.2.3. Оптимизация способа извлечения ионных ассоциатов тропеолина 000-11-атропин................................. 108
2.2.4. Сравнение оптической плотности растворов ионных ассоциатов атропина и суммы алкалоидов красавки............. 109
2.2.5. Изучение полноты экстракции ионных ассоциатов гиос-циамина и скополамина в зависимости от соотношения объемов водной и хлороформной фаз.................................. 110
2.2.6. Влияние природы кислоты на величину оптической плотности растворов ионных ассоциатов гиосциамина............. 113
2.2.7. Зависимость оптической плотности ионных ассоциатов
от концентрации гиосциамина.................................... 114
2.2.8. Влияние на результат определения объема экстракта и времени экстракции........................................ 116
2.2.9. Метрологические характеристики методик анализа. Опы-
24
что тропановые алкалоиды по химической природе - сложные эфиры, поэтому при работе с ними следует избегать реагентов, вызывающих гидролиз.
Наиболее щадящий способ экстракции - водой, однако он требует специальной аппаратуры [4, 63]. Применение разбавленных минеральных кислот позволяет ускорить процесс [114, 150, 155] и увеличить выход алкалоидов, но, одновременно, возрастает количество экстрактивных веществ неалкалоидного характера [63].
Экстракция этиловым спиртом методом перколяции [43] достаточно длительна и также сопряжена с выделением большой массы примесей. Этот способ можно сравнить со способом получения густого экстракта красавки, содержание алкалоидов в котором составляет 1,5-2% [60].
Экстракция 70%-ным этанолом при нагревании в течение 45 минут, рекомендованная как головная стадия метода количественного определения суммы алкалоидов [67], может приводить к образованию апоатропина и тропинона. Аналогично возможен гидролиз при экстракции в течение 24 часов [31].
В связи с вышеуказанными недостатками гидрофильных экстрактов, в аналитической практике и в действующих технологических регламентах преобладают способы извлечения тропановых алкалоидов в виде оснований.
При этом способе экстракции необходима предварительная обработка сырья щелочными агентами, что может вызвать рацемизацию гиосциамина даже при комнатной температуре. Скополамин несколько более устойчив [15, 126].
В качестве органического экстрагента в литературе нередко называется хлороформ [1, 37, 54, 95, 140] в сочетании с раствором аммиака, причем, в одной из публикаций [54] данное сочетание рекомендуется как лучшее. Однако, это не согласуется с результатами применения хлороформной экстракции в промышленности, где от нее отказались еще в 1949 году [58]. В технологических документах специально оговаривается, что применяемая на стадии очистки хлороформная экстракция не должна продолжаться более 2 часов, иначе в экстракте накапливаются продукты осмоления и выход алкалоидов снижается.
25
Более индифферентным растворителем считается диэтиловый эфир [24, 100, 103,106]. Основной его недостаток - пожаро- и взрывоопасность, особенно при использовании значительных объемов.
Применяют также дихлорэтан [7] в смеси с щелочными агентами и этанолом; этанол с 25%-ным раствором аммиака (9:1); этанол с триметиламином (9:1) и метанол в сочетании с буферным раствором pH 10 [116, 155, 159].
Следует в связи с этим напомнить, что монография [15] рекомендует получать рацемат гиосциамина и скополамина в подщелоченном спирте.
В лабораторной практике используют также тройные смеси:
- диэтиловый эфир - этанол - 25%-ный раствор аммиака (80:10:5) в аппарате Сокслета [130];
- метанол - хлороформ -25%-ный раствор аммиака при интенсивном встряхивании [116].
По-видимому, в лабораторной практике следует использовать различные способы экстракции в зависимости от конкретных задач. Если можно пренебречь рацемизацией гиосциамина, допустимо применение спиртов в присутствии щелочи. При необходимости сохранения природного состава алкалоидов, экстракцию следует проводить водой, водными растворами спиртов, разбавленными растворами кислот при комнатной температуре или специально очищенным диэтиловым эфиром в условиях слабого подщелачивания.
1.3.1.Очистка извлечений в лабораторных условиях
Первичные извлечения из растительного сырья содержат большое количество балластных веществ различной природы, поэтому для выделения алкалоидного комплекса прибегают к различным способам очистки.
- Київ+380960830922