РАЗДЕЛ 2
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
Настоящая работа выполнена в 1998-2001 гг. на кафедре микробиологии и вирусологии, кафедре инфекционных и паразитарных болезней сельскохозяйственных животных Крымского государственного аграрного университета, в отделе вирусологии Республиканской государственной лаборатории ветеринарной медицины АРК (филиал кафедры) и в лаборатории вирусологии Республиканской СЭС, а также в неблагополучных по респираторным болезням телят животноводческих хозяйствах Автономной Республики Крым.
В проведении ряда комплексных исследований принимали участие А.Ф. Шуляк, В.Г. Гумеров, В.И. Белоусов, Т.В. Гальнбек, Т.Г. Прокопенко.
Научно-производственные опыты, апробация и производственные испытания полученных результатов проведены в базисных животноводческих хозяйствах учхоза "Коммунар" Крымского ГАУ, "Широкое", "Пригородное" и МТФ п.-ф. "Южная" Симферопольского района, а также в хозяйствах пяти районов АРК, расположенных в разных климатогеографических зонах Крымского полуострова.
Работу проводили на 1179 телятах красной степной, голштинской, англерской пород различного пола, массы и возраста, 38 коровах красной степной породы, абортировавших и родивших нежизнеспособных телят, 12 кроликах, 36 морских свинках, 64 белых крысах, 80 белых мышах, 370 куриных эмбрионах.
Бактериологическим и вирусологическим исследованиям подвергнуто 43 проб смывов из носа телят, 148 проб патологического характера от павших и вынужденно убитых животных. Проведены серологические исследования на вирусы ПГ-3, адено-, ИРТ, РС и хламидии 1426 проб сыворотки крови телят. Из них двукратно на указанные инфекции исследовано 647 проб.
В работе применяли клинико-эпизоотологические, бактериологические, вирусологические, серологические, гематологические, цитологические методы, используя при этом микроскопы: МБИ-3, МБИ-6, МБС-10, люминисцентный, марки "Люмам", биологический марки "Биолам", рН-метры, рефрактометры КФК-2, УРЛ-1, термостаты водяные и электрические (VEB-Berlin, UTУ-4-Краков, ТС-8М-2, ТГУ-02-200) с температурой 37±1oС, холодильники с температурой (+4±2-25±5)oС, холодильная камера ХК-200, центрифуги ЦЛУ-1, ОС-6М, ОПн-8, ЦВР-1, автоклав ВК-30, шкаф сушильный стерилизационный ШСС-80п.
На первом этапе исследований использовали материалы ветеринарной отчетности Республиканского Управления государственной ветеринарной медицины с ветеринарной инспекцией при Совете Министров АРК, Республиканской государственной лаборатории ветеринарной медицины АРК и собственные исследования. Изучали влияние условий содержания и кормления животных, зоогигиенические показатели с учетом общей бактериальной обсемененности воздушной среды помещений, различных стрессовых факторов, уровня ветеринарного обслуживания на возникновение и характер проявления респираторных болезней животных.
При ветеринарно-санитарной и зоогигиенической оценке содержания крупного рогатого скота в базисных хозяйствах учитывали показатели микроклимата во все сезоны года, сроки заполнения помещений телятами, периодичность их очистки и санации. Температуру и относительную влажность воздуха определяли с помощью психрометра Ассмана и регистрировали суточными и недельными термографами и гигрографами, атмосферное давление - барометром-анероидом; скорость движения и охлаждаемую способность воздуха - спиртовым шаровым кататермометром; содержание углекислого газа - титрометрическим методом; аммиак и сероводород - газоанализатором УГ-2; освещенность - люксметром типа Ю-М16. Учет общей бактериальной обсемененности воздушной среды проводили в чашках Петри методом оседания микробов на плотной питательной среде (МПА).
Этиологический спектр возбудителей респираторных болезней телят устанавливали путем анализа эпизоотической ситуации в неблагополучных хозяйствах и молочно-товарных фермах, придерживаясь "Рекомендаций по методике эпизоотологического исследования" [187], наблюдения за клиническим проявлением заболевания, изучения патологоанатомической картины вскрытия павших и вынужденно убитых животных, а также на основании результатов серологических, вирусологических и бактериологических исследований по выделению и идентификации основных возбудителей, причастных к этиологии респираторных болезней телят.
Исследования проб сывороток крови и патологического материала от больных, вынужденно убитых, павших и переболевших животных проводили согласно "Методических указаний по лабораторной диагностике вирусных респираторно-кишечных инфекций крупного рогатого скота", ГУВ Госагропрома, утвержденных 28.08.88 г. [127]. Серологическая диагностика основывалась на выявлении специфических антител к вирусам парагриппа-3, инфекционного ринотрахеита, респираторно-синцитиальному, адено- и хламидиям в сыворотке крови больных и переболевших телят. Участие этих возбудителей в этиологии респираторных болезней молодняка крупного рогатого скота подтверждали на основании установленного 4-х кратного прироста антител в парных пробах сыворотки, взятых в начальной стадии заболевания и через 2-3 недели после реконвалесценции. Антигемагглютинины к вирусу парагриппа-3 определяли в реакции торможения гемагглютинации (РТГА) с парагриппозным антигеном 3-го типа, изготовленным Приволжской биофабрикой. Антитела к респираторно-синцитиальному вирусу определяли в реакции диффузионной преципитации (РДП) с использованием набора диагностикумов, изготовленного Приволжской биофабрикой. Наличие специфических антител к аденовирусу крупного рогатого скота устанавливали в реакции непрямой гемагглютинации (РНГА) со стандартным аденовирусным эритроцитарным диагностикумом, изготовленным на Приволжской биофабрике. Антитела к вирусу инфекционного ринотрахеита определяли методом постановки ИФА, в реакции нейтрализации на субкультуре клеток почек эмбриона коровы (ПЭК) совместно с Р.Х. Хамадеевым. В качестве антигена использовали культуральную жидкость вируса ИРТ (штамм ТК) с инфекционной активностью 5,5 lg ТЦД50/см3. Антитела к хламидийному антигену выявляли в реакции связыва
- Київ+380960830922