РОЗДІЛ 2. МАТЕРІАЛИ І МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕННЯ
Враховуючи потребу практичної медицини в розширенні номенклатури засобів для
лікування простатитів, а також дані про фармакологічні властивості і
застосування продуктів бджільництва в урології, ми зупинили свою увагу на
фенольному гідрофобному екстракті прополісу (ФГЕП) та обніжжі бджолиному (ОБ),
що широко застосовуються в народній і офіційній медицині.
Об'єктом досліджень став препарат феполен, що є комплексом ФГЕП та ОБ,
створений на кафедрі аптечної технології ліків НФаУ під керівництвом професора
А.І.Тихонова.
Діючими компонентами ФГЕП є поліфенольні сполуки – флавони, флавоноли,
оксикумарини, фенолокарбонові кислоти (81,33% від усієї маси фенольної
гідрофобної фракції прополісу це флаваноли – кверцетин, кемпферол; флаванони –
апігенін, лютеолін, робіданол) (рис. 2.1) [76].
ОБ є складним концентратом багатьох цінних біологічно активних речовин: білкові
елементи (білки і вільні амінокислоти), ліпіди (в основному тригліцериди та
фосфоліпіди), повний спектр усіх відомих вітамінів або їх попередників, макро-
та мікроелементи (калій, кальцій, магній, залізо, цинк, мідь, кобальт, фосфор,
марганець, сірка, срібло, нікель, натрій, хлор), фенольні сполуки (флавоноїди і
фенолокислоти), фітогормони (барсини).
Субстанція ФГЕП – буро-коричневий порошок зі специфічним запахом, практично
нерозчинний у холодній воді, хлороформі. Розчинюється у 95% спирті.
Субстанція ОБ – світло-жовті до коричневого кольору грудочки твердої
консистенції, неправильної форми, масою від 5 до 20 мг. Має специфічний запах,
характерний солодкуватий смак.
Феполен розфасовують у тверді желатинові капсули з жовтим непрозорим корпусом і
зеленою непрозорою кришечкою.
Феполен одержують шляхом приготування суміші висушеного ОБ, попередньо
обробленого 90% етиловим спиртом, з аеросилом та ФГЕП. Капсульну масу дозують у
тверді желатинові капсули. Отримують капсулу масою 0,25 г наступного складу
(мас.%):
фенольний гідрофобний екстракт прополісу – 48
обніжжя бджолине – 48
допоміжні речовини (наприклад: аеросил, крохмаль) – 4
Аналіз хімічної структури сполук ФГЕП та ОБ і наведені в огляді літератури дані
про біологічну дію фенольних сполук та різноманітних БАР ОБ дозволили
припустити наявність у феполена різних видів фармакологічної дії.
Виходячи з мети і завдань дисертаційної роботи, експериментальні дослідження
видавалося доцільним побудувати таким чином: вивчити фармакодинаміку феполену –
протизапальну, анальгетичну, антиоксидантну, мембраностабілізуючу. Потім
дослідити активність препарату на моделях простатитів різного генезу у щурів,
вивчити вплив феполену на сперматогенез на здорових щурах. Вивчити
нешкідливість феполену в гострому та хронічному експерименті. Враховуючи роль
печінки у підтримці андрогенної насиченості організму чоловіків та
патогенетичне значення порушення гормонального балансу, а також можливе тривале
застосування досліджуваного засобу одним з етапів стало вивчення гепатотропної
дії феполену.
Рис.2.1 Діючі речовини фенольного гідрофобного екстракту прополісу
Як було показано в огляді літератури, важливим патогенетичним механізмом
простатиту є запалення, що призводить до порушення структури та функції органу.
У зв'язку з цим, а також враховуючи хімічний склад діючих речовин феполену, що
припускає наявність протизапальних властивостей завдяки великій кількості
фенольних сполук, доцільно було провести скринінгове дослідження для
встановлення найбільш ефективної дози феполену на моделі гострого ексудативного
карагенінового запалення стопи щурів. У механізмі розвитку карагенінового
запалення беруть участь різноманітні медіатори запалення: в перші 30-90 хв. у
патогенезі розвитку набряку беруть участь гістамін і серотонін, в інтервалі між
1,5-2,5 годинами – кініни, а між 2,5-5,5 годинами – простагландини [24,125].
Визначена динаміка виділення медіаторів, які беруть участь в розвитку процесу
ексудації на даній моделі, дозволяє припустити також механізм дії речовини, що
вивчається. Досліди проводили на щурах масою 150-170г. Набряк стопи викликали
субплантарним уведенням у праву задню лапу 0,1 мл 1-% розчину карагеніну фірми
Serva. Феполен уводили внутрішньошлунково у дозах 15, 30, 60, 100, 130 мг/кг.
Як препарат порівняння за протизапальною дією використовували диклофенак натрію
у дозі 8 мг/кг (ЕД50 за антиексудативним ефектом на цій моделі) [24].
Диклофенак натрію вважається “золотим стандартом” за ефективністю при лікуванні
запальних захворювань різноманітного генезу [37]. Досліджуваний засіб і
препарат порівняння уводили внутрішньошлунково за 1 годину до ін'єкції
флогогенного агенту. Тварини групи контрольної патології одержували
еквівалентну їх масі кількість води. Про розвиток набряку судили за збільшенням
об'єму лапи, який вимірювали у динаміці через 1, 2, 3, 4, 5 і 24 години за
допомогою онкометра за Захаревським А.С. [24]. Протизапальну активність
визначали за ступенем зменшення набряку у тварин, які отримували препарати, в
порівнянні з тваринами групи контрольної патології та виражали у відсотках.
Результати обраховували за формулою 2.1:
A (% пригнічення)=
Vk - Vo
Ч 100 % (2.1), де
Vk
Vk – середнє значення об'єму лапи у групі контрольної патології;
Vo – середнє значення об'єму лапи у групах, що отримували препарати.
Для встановлення механізму протизапальної дії феполену було обрано модель
асептичного ексудативного запалення, викликаного введенням зимозану (провідна
роль на початковій стадії інволюції цього запалення відводиться лейкотрієнам -
медіаторам запалення, які утворюються внаслідок ліпооксигеназного окиснення
арахідонової кислоти).
Дослідженн
- Київ+380960830922